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    elisa新手快來了解elisa基本性質(zhì)

    發(fā)布時(shí)間: 2015-06-29  點(diǎn)擊次數(shù): 818次

        什么是定性?什么是定量?

        這些問題是不少實(shí)驗(yàn)新手在購(gòu)買elisa試劑盒時(shí)會(huì)咨詢到的問題。由于客戶們?cè)谟嗁?gòu)產(chǎn)品的時(shí)候咨詢到的是我司業(yè)務(wù)員,對(duì)于一些產(chǎn)品訂購(gòu)流程,基本信息(如規(guī)格)等問題,業(yè)務(wù)員們會(huì)跟您細(xì)細(xì)的解說,涉及到技術(shù)問題時(shí)業(yè)務(wù)員會(huì)幫您安排技術(shù)指導(dǎo)。
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        什么是定性?什么是定量?
    定性是指判定物質(zhì)有無的屬性。
    定量是指判定物質(zhì)的用量,定量的前提是定性,目前生化試劑大都為定量檢測(cè)。
        標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是具有一種或幾種物理或化學(xué)性質(zhì)已經(jīng)充分確定,并用于校正儀器、評(píng)價(jià)一種測(cè)量方法的物質(zhì);
        而校準(zhǔn)物是一種用于校準(zhǔn)、分度或修正測(cè)量值的物質(zhì)或裝置,這種物質(zhì)和裝置必須跟蹤國(guó)家或的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或裝置;校準(zhǔn)物是公司用來校準(zhǔn)某檢測(cè)系統(tǒng)(儀器+試劑+方法)的;
        質(zhì)控品與校準(zhǔn)品的區(qū)別:組成成份不一樣;溯源的要求不一樣;用途不一樣。
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        將樣品加入孔中并孵育,假如其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEVIgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng):450nm處丈量O.D.值,按照測(cè)試尺度,O.D.值大于或即是Cut-Off值的樣品被以為是初試陽(yáng)性。應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段。
        包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別,所以保留抗原很重要。封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。但有時(shí)因?yàn)樵囼?yàn)的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。

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