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    ELISA實(shí)驗(yàn)老手教您怎樣正確使用ELISA試劑盒

    發(fā)布時(shí)間: 2015-08-11  點(diǎn)擊次數(shù): 786次

    1、銷售問:為什么有的客戶在做間接Elisa法測試小鼠血清中的IgE抗體,設(shè)空白對照、和陰性對照、陽性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬、10萬、20萬不等,用的是生物素標(biāo)記的羊抗鼠IgE抗體,ELISA試劑盒和親和素的辣根過氧化物酶??墒墙Y(jié)果除了空白對照孔沒有顏色外,其余各孔全有顏色,而且OD值都相差不大,為什么?
    技術(shù)回答:可能原因如下:
    (1) 水質(zhì)被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
    (2) 洗滌不充分,樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔,充分洗滌。
    (3) 移液頭重復(fù)使用,ELISA試劑盒未洗凈或消毒不*; 防止辦法移液頭一次性使用。
    (4) 酶標(biāo)板靈敏度過高。
    (5) 一抗顯色時(shí)間的控制等等,關(guān)于ELISA的每一步都要注意才行。
    銷售問:ELISA加樣時(shí)的防錯(cuò)小經(jīng)
    技術(shù)回答:
    (1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,ELISA試劑盒比如報(bào)紙,墊在下面,這樣,加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會(huì)變小,沒加的字正常,非常容易區(qū)分。
    (2)可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別。
    (3)在標(biāo)本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產(chǎn)生小氣泡,也可以加以區(qū)分。

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