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    ELISA試劑盒中幾大要點(diǎn)影響非特異性顯色的

    發(fā)布時(shí)間: 2016-03-07  點(diǎn)擊次數(shù): 920次

    影響ELISA試劑盒中非特異性顯色的緣由許多,如試劑盒特異性、查驗(yàn)標(biāo)本中含酶符號(hào)物的煩擾物,操作進(jìn)程中的疑問。這篇文章就這一緣由作一簡(jiǎn)明剖析,以便能夠經(jīng)過以上辦法把非特異顯色降至zui低極限,然后行進(jìn)檢測(cè)的特異性,并得到更、牢靠的試驗(yàn)作用。 

    查驗(yàn)標(biāo)本中富含酶符號(hào)物的煩擾物 

    內(nèi)源性煩擾物:類風(fēng)濕因子(RF)、黃疸等,類風(fēng)濕因子是可作用于多種動(dòng)物以及人IgGFc段的本身抗體,大都為IgM類,能充任抗原成分與固相及酶標(biāo)抗體反響,然后出現(xiàn)非特異性顯色。 

    黃疸血標(biāo)本中常富含內(nèi)源性過氧化物酶,如用辣根過氧化物酶為符號(hào)物,就有能夠發(fā)作非特異性顯色。 

    外源性煩擾物,常常因樣品收集、儲(chǔ)存、處置不妥構(gòu)成如樣品溶血,被細(xì)菌污染,標(biāo)本凝聚不全等。溶血標(biāo)本,紅細(xì)胞溶解割裂,釋放出血紅素構(gòu)成,而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物,以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本能夠會(huì)添加非特異性顯色。如有細(xì)菌污染,菌體中能夠富含內(nèi)源性HRP,有國(guó)內(nèi)報(bào)導(dǎo)酶免HAg試劑檢測(cè)溶血標(biāo)本時(shí)可構(gòu)成假陽性。如在冰箱中保管過久,其間的IgG可發(fā)作聚合,在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。因而,血標(biāo)本在收集處置時(shí)應(yīng)留心,在冰箱中保管不易過久。

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